本文目录一览给药浓度乘以多糖提取率就是最后给动物灌喂的浓度2，请教实验动物中高中低剂量如何确定的及依据3，抗生素单拷贝整合到染色体后用多大浓度筛选4，请问用HPLC测动物血浆和内脏内药物浓度之前该怎样处理5，不同给药组动物指标比较用什么……
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1，给药浓度乘以多糖提取率就是最后给动物灌喂的浓度
2，请教 实验动物中高中低剂量如何确定的及依据
实验动物中高中低剂量如何确定的及依据1、先用少量小鼠粗略的摸索山毒剂量或致死剂量，然后用中毒剂量或致死剂量的若干分之作为应用剂量，一般可取1／10-1／5。2、确定剂量后，如第一次实验的作用不明显，动物也没有中毒的表现(体重下降、精神不振、活动减少或其它症状)，可以加大剂量再次实验。如出现中毒现象，作用也明显，则应减少剂量再次实验。在一般情况下，在适宜剂量范围内，药物的作用常随剂量的加大而增强。所以有条件：时，最好同时用儿个剂量做实验，以便迅速获得关于药物作用的较完整的资料。如实验结果出现剂量与作用强度毫无规律时，则更应慎重分析。3、用人动物进行实验时，开始的剂量可采用给鼠类剂量的十五分之一至二分之一，以后可根据动物的反应调整剂量。4、确定动物的给药剂量时，要考虑给药动物的年龄大小和体质强弱。—般说，确定的给药剂量是指成年动物的，如果幼小动物，剂量应减小。服量为100，灌胃量应为100-200，皮下注射量为30—50，肌肉注射量为25—30，静脉注射量为25。二、实验动物给药量的计算方法动物实验所用的药物剂量一般按毫克／公斤体重或克／公斤体重计算，应用时须从已知药液的浓度换算十相当于每公斤体重应注射的药液量(毫升数)，以便给药。三、人与动物的给药量换算方法人与动物对同药物的耐受性相差很大。一般说来，动物的耐受性比人大，也就是单位体重动物的用药量比人要人，近几年来新药药效研究中多以下列公式计算：D2=D1×K2／K1×W1/W2D为药物剂量，K为常数，W为动物体重(kg)(1指人；2指动物。人及不同种类动物的K值不同，人1．6、猴11．2、兔10．1、大鼠9．1、小鼠9．1、鼠9．8、猫9．8。如一例体重为70kg的人，某药剂量为20ug．kg-1．D-1，—只5kg重的猴为53．6 ug．kg-1．D-1，一只10kg重的大为40．4ug．kg-1．D-1，而一只20g重的小鼠为260．6 ug．kg-1．D-1(见表三)人用剂量与不同种类动物间剂量的关系。
3，抗生素单拷贝整合到染色体后用多大浓度筛选
可以做150g/ml、 200g/ml、300g/ml三个浓度进行筛选。 为分析转化的功能和表达需要DNA稳定转染至宿主细胞染色体.外源基因进入细胞后,部分能够通过细胞质进入细胞核内,根据细胞类型,至多80%的进入 核内的外源DNA得到瞬时表达.极少数情况下,进入细胞的外源DNA通过系列非同源性分子间重组核连接,形成巨大的***结构最终整合进细胞染色体.细胞 基因组自由部分表达,所以整合并不一定意味着表达,只有整合到表达区的基因才会表达,而且整合到不同的染色体区段的外源基因的表达的量也是不同的.由于摄 取、整合、表达外源基因是小概率事件,通常根据新表型筛选稳定转染体。 一般情况下这种新表型由共转染的编码抗生素抗性基因提供.细菌Tn5转座子序列 （neo抗性基因）携带的氨基糖苷磷酸转移酶可以将G418转变成无毒形式.G418是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它 通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞,也包括原生动物和蠕虫.是稳定转染最常用 的选择试剂.当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效 表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长.G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛 应用.在进行转染时细胞膜受到影响,抗生素可能对细胞产生较大影响,加上G418有杀菌作用,所以有人主张转让时不加其它抗生素.其实G418本身有很好 的杀菌效果,在用G418进行筛选的过程中很少会发生污染.但有一点,在脂质体转染时所 用培养基中最好不加任何抗生素.可能是脂质体对细胞膜有影响,可能此时加抗生素对细胞损伤较大.因为庆大霉素、链霉素、G418均是氨基糖甙 类药物,其药理作用完全一样.所以没有必要再用,而且由于另外抗生素的添加实际增加氨基糖甙类药物的浓度,剂量有误差,不利于各实验室之间的交流,在实际 操作中,培养液中有抗生素对细胞培养与筛选影响不大.Protocal1.G418的配制： 取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存.2.细胞培养：取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药.3.制备筛选培养基：在100g/ml～1000g/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100g/ml、400g/ml、800g /ml、1000g/ml,按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基.4.加G418筛选： 吸除培养孔中培养基,PBS洗涤一次,每孔中加入不同浓度的筛选培养基.5.换液：根据培养基的颜色和细胞生长情况,每3~5天更换一次筛选培养基.方法同4.6.确定最佳筛选浓度：在筛选10～14天内能够杀死所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度.在第一轮就筛选出最佳G418浓度的可能性不 大,最有可能的是出现这种情况：用某一浓度G418的量在筛选14天后还不能杀死细胞,而用下一个梯度的G418的量在10天前就看不到活细胞了.假如是 400g/ml不能杀死细胞,而800g/ml在第5天就把所有细胞都杀死了,则可以再用500g/ml、600g/ml、700g/ml进一 步筛选,以确定最佳筛选浓度!心得：由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需要在这么大范围内进行筛选。
4，请问用HPLC测动物血浆和内脏内药物浓度之前该怎样处理
血液抗凝后离心,去上层血浆,再通过液-液萃取,沉淀蛋白或者固相萃取,(内脏要低温冷冻,然后匀浆,再提取,)然后通过HPLC测定,如果浓度很低,就要用液质联用.同意楼上的，但LZ应当先建立方法学才是啊！不建立方法学怎么可以就测样呢？
5，不同给药组动物指标比较用什么方法
不同给药组动物指标比较用什么方法如果是同一组患者治疗前后某项指标的变化是否存在显著差异，通常可以采用配对样本T检验的方式进行考察。如果是两组患者，则需要具体分析了：（1）如果你所谓的两组患者一组是病人，另一组是作为参照组（或者控制组，通常只是服用安慰剂）来处理的，那么指标的变化可以通过独立双样本T检验的方法处理；（2）如果两组患者并非这样处理的，而是两组病情程度不同的病人，那么由于两组患者的基础不同，建议分成两组，分别采用配对样本T检验处理；（3）如果两组患者的基础一致（如病情程度类似，年龄、性别等分布类似），只是采用了两种不同治疗方案，则可以采用独立双样本T检验处理。水分0.2-0.3 脂肪93.8 酸值 1.1-2.2 皂物价《200 碘值《47 融化脂肪应透明，外部脂肪熔点48
6，动物试验给药剂量怎么定
ic50是半抑制率，意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度，然后计算各自的抑制率，以药品的浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，然后得到50%抑制率时候的药品浓度，就是ic50。要点：药品2倍稀释，多做梯度，做点线图即可!观察一种药物对实验动物的作用时，一个重要的问题就是给动物用多大的剂量较合适。剂量太小，作用不明显，剂量太大，又可能引起动物中毒致死。可以按下述方法确定剂量： 1. 先用少量小鼠粗略地探索中毒剂量或致死剂量,然后用小于中毒量的剂量观察一种药物对实验动物的作用时，一个重要的问题就是给动物用多大的剂量较合适。剂量太小，作用不明显，剂量太大，又可能引起动物中毒致死。可以按下述方法确定剂量：1.先用少量小鼠粗略地探索中毒剂量或致死剂量,然后用小于中毒量的剂量，或取致死量的若干分之一作为应用剂量，一般可取1/10～1/5。2.植物药粗制剂的剂量多按生药折算。3.化学药品可参考化学结构相似的已知药物，特别是化学结构和作用都相似的剂量。4.确定剂量后，如第一次用药的作用不明显，动物也没有中毒的表现,可以加大剂量再次实验。如出现中毒现象，作用也明显，则应降低剂量再次实验。在一般情况下，在适宜的剂量范围内，药物的作用常随剂量的加大而增强。所以有条件时，最好同时用几个剂量作实验，以便迅速获得关于药物作用的较完整的资料。如实验结果出现剂量与作用强度之间毫无规律时，则更应慎重分析。5.用大动物进行实验时，防止动物中毒死亡,开始的剂量可采用鼠类的1/15～1/2,以后可根据动物的反应调整剂量。6.确定动物给药剂量时，要考虑给药动物的年龄大小和体质强弱。一般说确定的给药剂量是指成年动物的，如是幼龄动物，剂量应减小。如以狗为例：6个月以上的狗给药剂量为1份时，3～6个月的给1/2份，45～89日的给1/4份，20～44日的给1/8份，10～19日的给1/16份。7.确定动物给药剂量时，要考虑因给药途径不同，所用剂量也不同。以口服量为100时，皮下注射量为30～50，肌肉注射量为20～30，静脉注射量为25。二、人与动物的用药量换算方法人与动物对同一药物耐受性不同，一般动物的耐受性要比人大，单位体重的用药量动物比人要高。必须将人的用药量换算成动物的用药量。一般可按下列比例换算：人用药量：1小鼠、大鼠：50～100兔、豚鼠：15～20狗、猫：5～10以上系按单位体重口服用药量换算。如给药途径为静脉、皮下、腹腔注射，换算比例应适当减小些。
7，给药剂量临床常用量动物等效面积系数培养基内血清稀释度中培养
有限稀释法是一种常用的克隆方法。 将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数，计出1mL的细胞数。 用HT培养液稀释， 使细胞浓度为50～60个/mL，于96孔培养板中每孔加0.1mL(五六个细胞/孔)。接种2排，剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释，再接种2排，如此类推，直至使每孔含0.5～1个细胞。培养7～10d后，选择单个克隆生长的阳性孔再一次进行克隆。一般需要如此重复3～5次，直至达100％阳性孔率时即可，以确保抗体由单个克隆所产生。例如： 实验细胞克隆化培养技术—有限稀释法一、实验目的： 1、掌握用有限稀释法进行细胞克隆化培养技术； 2、学会细胞克隆形成的辩观察技能； 3、配合抗体分泌细胞筛选技术，确定抗体分泌细胞。 二、实验原理： 克隆化培养即单细胞培养技术，用有限稀释法进行杂交瘤细胞克隆化培养，可以及时确定阳性杂交瘤细胞株，同时淘汰因发生染色体丢失或抗体的轻、重链基因分离而出现无抗体分泌阴性细胞株。 一般杂交瘤细胞需经过52—3次反复克隆后，才能达到100%细胞阳性率。 该办法亦适用于一般细胞培养中的细胞纯化、突变细胞株的选择，识别和分离。是细胞株的常用方法。 三、实验材料： 杂交瘤细胞、25毫升培养瓶、96孔细胞培养板（天津有机玻璃厂）、移液管（1毫升、5毫升、10毫升）、弯头滴管、倒置显微镜、CO2培养箱、白细胞计数板、计数器、盖玻片、防水笔、RPMI-1640、小牛血清、青链霉素、10毫升刻度离心管，00橡胶塞，饲养细胞（3-6×105/ml、见腹腔细胞的制备）。 四、实验步骤： 1、分装了每孔0.1毫升腹腔细胞的96孔细胞培养板（可提前24小时准备就绪，置CO2培养箱中备用）； 2、自细胞培养瓶中收集长势良好的杂交瘤细胞（亦可自24孔培养板孔中收集），制成悬液。3、按白细胞计数方法准确计得细胞悬液的细胞数，一般在105/毫升左右。 4、取3支10毫升刻度离心管排列在超净工作台试管架上，先用无血清培养基将细胞稀释至103/毫升，再用含15%小牛血清的完全培养基稀释到101/毫升细胞，即每0.1毫升1个细胞。 5、每孔0.1毫升细胞悬液。 6、置37℃5%CO2培养箱，4天后取出观察，并在板盖上打上标记，做好记录并统计结果。 7、继续培养时，则在第4-5天更换1/2培养基，约第7-9天可以收获培养液上清用于检测抗体。并重复检测1-2次。 8、选择单克隆生长孔，生长良好，阳性强者，转移到24孔板再做克隆经培养或扩大培养。 五、实验结果： 实验结果以总细胞孔（如96孔）中出现克隆孔统计出克隆百分率，并可进一步按单细胞孔、双细胞孔、多细胞孔分别计算出百分率。 六、注意事项： 1、注意无菌操作，一旦发现污染（孔）必须及时处理； 2、计数细胞要求准确，稀释量亦要准确，否则将造成一孔多细胞克隆或克隆百分离太低； 3、在计数克隆出现率之前，不宜更换培养液，也不宜强烈振动培养板； 4、做克隆化培养的小牛血清必须是优质血清； 5、若做克隆抗体检测时，特别要保护细胞的生长状况，防止细胞生长不良甚至丢失。 七、说明： 哺乳动物细胞通过分离、稀释接种，培养在适宜于单细胞生长的培养液中，形成细胞克隆。运用这项技术可以制作细胞成活曲线，即在接种相同数量细胞的培养瓶中，加入不同浓度的化学药品，或照以不同剂量的射线，观察其对细胞的听见害程度。由此可以在哺乳类细胞中进行诱变试验及分离突变细胞。
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